150株慢性肝病患者腹水培养分离菌及耐药性分析张立丽，陈铭，王晨，赵秀英，孙桂珍(首都医科大学附属北京佑安医院临检中心，北京)慢性肝病患者，尤其是肝硬化腹水患者常并发细菌性腹膜炎，是导致死亡的重要因素之一，而腹水细菌培养耗时长、阳性率低，治疗以经验用药为主，本文回顾分析近年腹水培养阳性数据，监测病原菌的耐药情况，为临床合理用药提供参考。1材料和方法1．1标本来源2006年10月至2008年12月我院诊断为慢性重型肝炎、肝硬化、肝癌患者的腹水标本。1．2仪器与培养基美国BD公司Baetee9120全自动血培养仪，使用Phoenixl00自动细菌鉴定仪进行细菌生化鉴定和药物敏感性分析，质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC，大肠埃希菌ATCC和铜绿假单胞菌ATCC。血培养瓶为BD公司Bactee9120全自动血培养仪配套含树脂培养瓶。其他细菌分离培养基及普通营养肉汤购自江门凯林公司。1．3方法1．3．1普通肉汤法直接将腹水标本接种于普通营养肉汤中，放人恒温培养箱内，24小时后观察肉汤管内状态，同时盲转血琼脂平皿和麦康凯平皿，进行分离培养，阴性标本3天后发报告。1．3．2全自动血培养仪器法床头采集标本后直接注入血培养瓶，接种量每个培养瓶不少于10ml，即时送检放入Bactee9120全自动血培养仪内，等待血培养仪的阳性报警提示，然后取出阳性血培养瓶进行涂片革兰氏染色，并转种血平皿及麦康凯平皿，如一直未报阳性5天后发报告。两种方法均使用Phoenix100自动细菌鉴定仪进行细菌生化鉴定和药物敏感性分析。2结果2．1病原菌检查腹水培养阳性病例均为单一病原菌感染，共分离出150株，31种病原菌，革兰氏阴性杆菌72株(48．0％，72／150)，产ESBIzl9株(26．4％，19／72)，均为大肠埃希氏菌(51．4％，19／37)；革兰氏阳性球菌76株(50．7％，76／150)，耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)23株(30．3％，23／76)，均为凝固酶阴性葡萄球菌，屎肠球菌耐高水平庆大霉素(HLGR)15株(71．4％，15／21)，耐高水平链霉素(HLSR)6株(28．6％，6／21)，粪肠球菌HLGR3株，HI_SRl株；2株解脲棒状杆菌，3株屎肠球菌为VRE。由表1可见，腹水标本中常见分离菌为凝固酶阴性葡萄球菌，大肠埃希氏菌，屎肠球菌，粪肠球菌。2．2病原菌耐药性革兰氏阳性球菌对青霉素，红霉素，复方磺胺均有高耐药率，3株屎肠球菌，1株沃氏葡萄球菌万古霉素耐药，2株酪黄肠球菌中介。3株屎肠球菌对吗啉恶酮为中介。革兰氏阴性杆菌对复方磺胺、哌拉西林、一代、二代、三代头孢菌素类有不同程度的高耐药率。亚胺培南的耐药率达到10．9％。详见表2，表3。表1腹水标本主要分离茵构成比(％)